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Misterboy鐵蟲 (正式寫手)
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[求助]
overlap PCR 已有2人參與
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| 有一個(gè)大約10kb的片段，分成兩段，用PCR擴(kuò)增出來了，且兩片段之間有25BP的同源臂，現(xiàn)在用overlap PCR一直擴(kuò)不出目的片段，出現(xiàn)了非特異型擴(kuò)增，primer用的還是原來的，一個(gè)片段的上游引物，一個(gè)片段的下游引物，延伸時(shí)間增加了一倍，但一直做不出來，各位有為有好一點(diǎn)的建議？ |
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4樓2019-05-09 22:40:27
qingai0128
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 56 (初中生)
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- 專業(yè): 化學(xué)生物學(xué)與生物有機(jī)化學(xué)
2樓2019-05-09 10:19:55
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-05-10 17:53:52
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-05-10 17:53:52
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建議先不加引物，其他正常加，進(jìn)行10個(gè)循環(huán)，待溫度下降，再加上引物進(jìn)行30個(gè)循環(huán) 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
Misterboy3樓2019-05-09 22:38:57
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
西門吹雪170: 應(yīng)助指數(shù)-1 2019-05-30 22:20:57
西門吹雪170: 應(yīng)助指數(shù)-1 2019-05-30 22:20:57
應(yīng)該能夠起作用，金幣 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2019-05-09 22:42:14
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