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admeng2004金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
關(guān)于GFP轉(zhuǎn)染后細(xì)胞動(dòng)態(tài)遷移拍攝的問(wèn)題
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求助各路大神。我們將人臍帶靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（huvecs）接種在準(zhǔn)備好的靜電紡纖維膜上，希望在共聚焦顯微鏡下觀察其在材料表面的遷移行為。為了使遷移過(guò)程可視化，我們先對(duì)培養(yǎng)在孔板板底的細(xì)胞用egfp質(zhì)粒進(jìn)行了轉(zhuǎn)染并將其接種在材料表面，接種后放到共聚焦顯微鏡下觀察。 蔡司lsm880，time series/tile scan 下調(diào)整pinhole ,master gain值等各項(xiàng)參數(shù)，但是在調(diào)試過(guò)程中（不超過(guò)1h），便發(fā)現(xiàn)視野下的熒光強(qiáng)度越來(lái)越弱，甚至到后來(lái)顯微鏡下已經(jīng)捕捉不到其信號(hào)。我們?cè)鴩L試了適當(dāng)增加轉(zhuǎn)染質(zhì)粒濃度，降低激光強(qiáng)度，降低拍攝頻率等多種方式，然而問(wèn)題依舊沒(méi)有得到解決  期待大神解救····· |
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2樓2019-11-15 16:18:49
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