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黃金伏地魔新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
DHE紅色熒光探針測(cè)定酵母細(xì)胞內(nèi)ROS水平
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關(guān)于用DHE紅色熒光探針測(cè)定ROS水平,我用的菌種是釀酒酵母(含有pYES2質(zhì)粒),我實(shí)驗(yàn)步驟是這樣的: 1.將菌株接到50ml SC-ura培養(yǎng)基中培養(yǎng)36h 2.分裝至兩個(gè)小玻璃瓶中各10ml(加或者不加1mmol過(guò)氧化氫),培養(yǎng)1h 3.用PBS漂洗2次,再加入100微升PBS,加入探針1微升,混勻,37° 30min,避光 4.用PBS漂洗2次,加入100微升PBS 5.去20微升于載玻片上,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡觀察 結(jié)果是用綠光激發(fā)后沒(méi)有紅色熒光出現(xiàn),請(qǐng)問(wèn)一下我可能是那個(gè)步驟出問(wèn)題了?還有就是有沒(méi)有人做成功的求分享! |
新蟲(chóng) (初入文壇)
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