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[交流]
提取microRNA
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| 請(qǐng)教：想問(wèn)一下提取血中的microRNA，用血清好還是用白細(xì)胞好？有啥區(qū)別？ |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
| 要考慮的是樣本類型以及提取的核酸種類，選擇針對(duì)性強(qiáng)，提取效率高的，如果要提取血細(xì)胞中的核酸，需要選擇血細(xì)胞核酸提取試劑或全血核酸提取試劑；如果要從血清或血漿中提取游離核酸或游離腫瘤核酸則要選擇血漿或血清核酸提取試劑，如果目標(biāo)基因豐度較低，需要較多的血漿或血清進(jìn)行富集提取，則需要選擇專門(mén)的血漿、血清核酸富集提取試劑。還有，如果核酸檢測(cè)的結(jié)果要面向臨床出具檢驗(yàn)報(bào)告，選擇的提取試劑盒要通過(guò)藥監(jiān)局審查，應(yīng)有藥監(jiān)局備案號(hào)，這一點(diǎn)非常重要。在進(jìn)行核酸提取實(shí)驗(yàn)時(shí)，切不可選錯(cuò)了試劑盒，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)效果和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。目前，國(guó)內(nèi)應(yīng)用較多的血液系列核酸提取試劑主要有Qiagen、Biog等，其血液系列核酸提取試劑均比較全面，包括血細(xì)胞、血清、血漿、DNA、RNA、小量提取、中量富集提取等，研究者可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行選擇。 |
3樓2019-05-27 09:08:59
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吃瓜的半仙(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-01-24 14:46:56
吃瓜的半仙(西門(mén)吹雪170代發(fā)): 金幣+3, 鼓勵(lì)回帖交流 2019-01-24 14:46:56
| 用血清還是白細(xì)胞根據(jù)的是你的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，白細(xì)胞檢測(cè)的細(xì)胞內(nèi)的miRNA，而血清中包括了游離的miRNA和外泌體中的miRNA，血清中miRNA相對(duì)比較穩(wěn)定，不太容易降解，但是還是建議凍存；但是細(xì)胞中的miRNA最好是快速分離出RNA，或者凍存于液氮中，或者速凍于液氮后轉(zhuǎn)到-80℃。其實(shí)兩者的提取液都是可以選擇BIODAI的，有師兄用過(guò)的，效果還是不錯(cuò)的。 |
2樓2019-01-17 08:45:02
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