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[交流]
質粒提取電泳條帶不正確 已有5人參與
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想請教一下,提完質粒跑電泳,質粒大小是5000bp,但是條帶只有第一次電泳正確了,后面用這管提取的質粒再次電泳一直在8000bp,沒有目的條帶,重新?lián)u菌提取也是在8000bp,這是怎么回事呀 用的天根質粒小提試劑盒 雙酶切再次電泳也是8000多bp,然后接著拿去做酶切連接轉化,驗證的質粒構建是否成功的時候,再次雙酶切,還是只有8000多的條帶,沒有插入的片段(700bp),但用質粒pcr,又能p出插入片段的條帶 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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謝謝,就是我重新提取了一遍質粒,然后還是條帶不正確,我試著繼續(xù)往下做了,插入目的片段,酶切連接轉化,通過提取轉化的菌的質粒,進行pcr,可以得到插入片段的條帶,但是還是得不到正確的質粒大小的條帶,我感覺像沒做出來,又像做出來了 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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就是提取完質粒去電泳,條帶第一次正確,第二次就不對了,看了網(wǎng)上的分析,就酶切后再去跑電泳,還是條帶不正確,用的都是用一次提取的質粒。就是不明白為什么條帶會突然不正確,不敢往下做 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
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