 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2198 | 回復(fù): 10 | |||
| 【懸賞金幣】回答本帖問題，作者柏拉圖的理想將贈(zèng)送您 5 個(gè)金幣 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
原味熒光雜交（FISH）細(xì)節(jié)求教 已有1人參與
|
|||
|
rt，樓主現(xiàn)在正在做FISH實(shí)驗(yàn)遇到了幾個(gè)問題，想請(qǐng)教下各位同行。問題如下： 1. 原位雜交一般是有個(gè)帶熒光的探針和DAPI復(fù)染，那請(qǐng)問在激光共聚焦上看的時(shí)候是選擇熒光探針的激發(fā)和發(fā)射波長，還是說要包括DAPI的激發(fā)和發(fā)射波長，從而進(jìn)行圖片疊加呢？ 2. 像我們實(shí)驗(yàn)室激發(fā)波長最低是488nm，明顯超過DAPI的340nm上限，那為什么我還能在激光共聚焦上看到有藍(lán)色的部分？ 3. 用DAPI復(fù)染的目的是什么？是為了觀察其他沒攜帶探針的微生物嗎？如果是，那可否不進(jìn)行復(fù)染呢？ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
推薦一些20種氨基酸檢測(cè)的實(shí)際應(yīng)用案例
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有264人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
|
十分感謝您的回復(fù)。另外我還有個(gè)小問題想再請(qǐng)教下：就是我下面A圖是雜交的情況，而C圖是無義雜交（沒雜交的），就是我不太明白這兩個(gè)有什么差別？明明都有染色，只是一個(gè)有亮點(diǎn)，一個(gè)沒有，但這樣會(huì)影響我們找到目標(biāo)微生物嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2023-01-28 19:25:38
恒意賽teh 
木蟲 (文壇精英)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 1669.6
- 散金: 5641
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 16937
- 在線: 592.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 27632785
- 注冊(cè): 2021-10-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 老年病藥物藥理
2樓2023-01-15 15:08:41
恒意賽teh
木蟲 (文壇精英)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 1669.6
- 散金: 5641
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 16937
- 在線: 592.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 27632785
- 注冊(cè): 2021-10-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 老年病藥物藥理
3樓2023-01-15 15:10:11
Davidzjy
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 209 (大學(xué)生)
- 金幣: 6650.8
- 散金: 431
- 紅花: 22
- 帖子: 964
- 在線: 393.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1887475
- 注冊(cè): 2012-07-11
- 專業(yè): 人類遺傳學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
|
從原理的角度講 FISH的探針通常標(biāo)記一個(gè)比較小的片段 這種熒光信號(hào)太小 在低倍鏡下很難找 DAPI這類復(fù)染劑的作用就是顯示細(xì)胞核位置的 你看復(fù)染劑的英文counterstain 其中前綴counter-表示“相反的” stain表示“染色;染料” 一般的顯微操作流程 也是先在低倍鏡下用DAPI找到細(xì)胞對(duì)好焦 然后切到高倍鏡 定下視野再切換到探針對(duì)應(yīng)的通道來觀察信號(hào) 至于最后一個(gè)問題 個(gè)人理解LZ的意思是問為什么肉眼能看到藍(lán)光打在玻片上——因?yàn)镈API的激發(fā)光屬于紫外線范圍 而濾光片會(huì)保留光譜上與激發(fā)光相近波長的光線 因此在光譜上與紫外線相鄰的可見光（藍(lán)紫色光）就被漏過了 一個(gè)類似的例子 實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院里常用的紫外消毒燈在工作時(shí) 肉眼看也是發(fā)藍(lán)紫色光 |
4樓2023-01-24 12:36:05
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 能動(dòng)297求調(diào)劑，本科川大 +3 | 邵11 2026-03-04 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)材料與化工281求調(diào)劑，有科研和獲獎(jiǎng)經(jīng)歷 +9 | wsxw 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 080500材料科學(xué)與工程 +5 | 202114020319 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料工程269求調(diào)劑 +7 | 白刺玫 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856材料工程，初試313調(diào)劑 +7 | 賣個(gè)關(guān)子吧 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 計(jì)算機(jī)學(xué)碩 分?jǐn)?shù)285求調(diào)劑
+4
|
glwshine 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化工270求調(diào)劑 +10 | 什么名字qwq 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 291求調(diào)劑 +3 | MuoLuo1312 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +4 | wxz2 2026-03-03 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +6 | wyyyqx 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工335求調(diào)劑 +5 | 摸摸貓貓頭 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研復(fù)試調(diào)劑，過國家線的同學(xué)都可報(bào)名 +7 | 黑！在干嘛 2026-02-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0854復(fù)試調(diào)劑 276 +5 | wmm9 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 302材料工程求調(diào)劑 +5 | Doleres 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿中石油（華東）本科齊魯工業(yè)大學(xué) +3 | 石能偉 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265分求調(diào)劑不調(diào)專業(yè)和學(xué)校有行學(xué)上就 +6 | 禮堂丁真258 2026-02-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +3 | cgyzqwn 2026-03-01 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +3 | aaadim 2026-03-01 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +3 | 水流年lc 2026-02-28 | 3/150 |
|