 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4055 | 回復(fù): 8 | |||
| 【有獎(jiǎng)交流】積極回復(fù)本帖子，參與交流，就有機(jī)會(huì)分得作者 Forzzainter 的 5 個(gè)金幣 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
Forzzainter新蟲 (初入文壇)
|
[交流]
同源重組連載體，長(zhǎng)得菌搖不起來，大神們知道怎么回事么？
|
||
|
RT 本人最近在做同源重組連接，將2-3個(gè)片段連接到載體上。 連接酶用的是擎科sosoo同源重組連接酶；載體用的是pBI121載體，長(zhǎng)度14758bp。 插入的片段大小1100bp左右；酶切位點(diǎn)用的BamH I單酶切，同源臂是擎科的技術(shù)給我設(shè)計(jì)的應(yīng)該沒問題。 載體用TAKARA的快切酶，確認(rèn)酶切開。 連接時(shí)摩爾比按兩種形式進(jìn)行計(jì)算。1載體：片段=1:10；2載體：總片段=1:10(即插入兩個(gè)片段時(shí)摩爾比為1:5:5；插入三個(gè)片段時(shí)摩爾比為1:3:3:3)。 熱激法轉(zhuǎn)入感受態(tài)，涂板過夜培養(yǎng)12-16h。第二天版上有長(zhǎng)菌，但是挑出來的菌都搖不起來，不知是什么原因。 做過pBI121空載的對(duì)照，證明感受態(tài)，平板以及含抗生素的LB液體都沒問題。也排除噬菌體干擾。 有懷疑過是不是因?yàn)檩d體太長(zhǎng)的緣故，但還是不太明白明明版上的菌長(zhǎng)得很好，為什么搖不起來。按理說同源重組應(yīng)該長(zhǎng)出來的都是陽性菌株，跪求大神解惑。  |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有85人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
腐草為螢8
金蟲 (著名寫手)
cat
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1501.1
- 散金: 2667
- 紅花: 8
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1832
- 在線: 187.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 4733435
- 注冊(cè): 2016-05-28
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
|
把lb重新配一個(gè)吧，我記得當(dāng)時(shí)，我?guī)屯瑢W(xué)先挑了一批，很小很小的時(shí)候挑的，搖菌長(zhǎng)起來了，后來長(zhǎng)大一點(diǎn)后，再挑的，就都沒長(zhǎng)起來，具體是因?yàn)槭裁淳筒惶宄?br />
發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2020-07-26 07:53:00
腐草為螢8
金蟲 (著名寫手)
cat
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1501.1
- 散金: 2667
- 紅花: 8
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1832
- 在線: 187.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 4733435
- 注冊(cè): 2016-05-28
- 專業(yè): 食品科學(xué)基礎(chǔ)
2樓2020-07-25 22:09:42
Forzzainter
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 40
- 散金: 5
- 帖子: 20
- 在線: 4.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 6446641
- 注冊(cè): 2017-05-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 林木遺傳育種學(xué)
3樓2020-07-26 00:01:49
5樓2020-07-26 10:29:08
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 080500材料科學(xué)與工程 +10 | 202114020319 2026-03-03 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 085701環(huán)境工程 求調(diào)劑 +7 | xiiiia 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京大學(xué)資源與環(huán)境專業(yè)283分求調(diào)劑 +3 | 追云?? 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料328求調(diào)劑 +10 | 一個(gè)蘿卜02 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
[考研] 0703化學(xué) 學(xué)碩 理工科均可 不區(qū)分研究方向 總分279求調(diào)劑 +7 | 1一11 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 沒有青基直接申請(qǐng)面上，感覺自己瘋了 +6 | kevin63t 2026-03-02 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 286 +6 | ksncj 2026-03-04 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 267化工調(diào)劑求助 +5 | 聰少OZ 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿314求調(diào)劑 +7 | 202111120625 2026-03-03 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 312求調(diào)劑 +8 | 醋精華了一下發(fā)?/a> 2026-03-03 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料專碩290求調(diào)劑 +3 | 杰尼龜aaa 2026-03-04 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
085600 英一數(shù)二272求調(diào)劑
 5+6
|
vida_a 2026-03-01 | 47/2350 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | 杰尼龜aaa 2026-03-03 | 4/200 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 請(qǐng)問大家，研究風(fēng)險(xiǎn)與應(yīng)對(duì)措施那里， 大家都怎么寫呢 ？ +3 | cauasen 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 理學(xué)，工學(xué)，農(nóng)學(xué)調(diào)劑，少走彎路，這里歡迎您！ +8 | likeihood 2026-03-02 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | Guo_yuxuan 2026-03-02 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +5 | 13853210211 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑285 +11 | 呂仔龍 2026-02-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 261求調(diào)劑 +3 | 陸lh 2026-03-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料學(xué)碩298分，求調(diào)劑 +6 | wsl111 2026-03-01 | 6/300 |
|