 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2783 | 回復(fù): 11 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
不完美的m新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
藍(lán)白斑篩選出現(xiàn)非菌落的藍(lán)色東西
|
|
| 本人小白，請教一下各位大神，最近在做分子克隆。在進(jìn)行藍(lán)白斑篩選的時(shí)候平板上出現(xiàn)了很小很小的藍(lán)色的東西，白色的一個都沒有，我想問下，那個藍(lán)色的是什么東西？為什么會出現(xiàn)這種情況呢？注：1、我所克隆的分子片段2500左右，PCR產(chǎn)物回收后跑膠驗(yàn)證條帶正常。2、按照PCR的體系（沒有加引物，使用Taq DNApoly酶，沒有dATP，用的dNTP代替的），72℃，反應(yīng)10min。加A尾巴。之前也是這么做的。3、接著做連接（使用T-Vector。DH5a。按照標(biāo)準(zhǔn)操作進(jìn)行的).涂板第二天出現(xiàn)藍(lán)色東西，感覺菌落一個都沒有長出來。不知道是什么東西，更不知道什么原因。求教！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有282人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
請教各位
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 612.3
- 帖子: 187
- 在線: 4.7小時(shí)
- 蟲號: 13199116
- 注冊: 2018-12-22
- 專業(yè): 果樹學(xué)
3樓2019-05-23 10:25:37
f?h?j?nv?h
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1036.4
- 散金: 27
- 紅花: 1
- 帖子: 242
- 在線: 2.4小時(shí)
- 蟲號: 10392260
- 注冊: 2018-09-21
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2019-05-17 09:13:05
黑暗微光
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 91.3
- 帖子: 19
- 在線: 3.3小時(shí)
- 蟲號: 6767931
- 注冊: 2017-06-16
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
★ ★
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2019-05-25 22:49:30
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2019-05-25 22:49:30
|
我最近也在做藍(lán)白斑篩選，一般藍(lán)斑表示非重組載體而白斑才是我們要的，白色的菌沒有，可能是連接試劑盒有問題，用連接試劑盒給的那個DNA去試一下，看有沒有白色菌落，如果有，說明你的模板有問題，如果沒有白色菌落，那就是你的試劑盒有問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
4樓2019-05-23 10:50:38
黑暗微光
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 91.3
- 帖子: 19
- 在線: 3.3小時(shí)
- 蟲號: 6767931
- 注冊: 2017-06-16
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
★ ★
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2019-05-25 22:49:45
西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2019-05-25 22:49:45
|
補(bǔ)充下，就算是白色的，也不一定就是你想要的，可能有小片段的DNA也插入到了載體上，破壞了那個β-半乳糖苷酶的閱讀框架，導(dǎo)致菌落呈現(xiàn)白色菌落。 而有時(shí)候藍(lán)色菌進(jìn)行快速pcr檢測的時(shí)候，同樣也可以p出來，可能是前段插入了，但是沒有破壞閱讀框架 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
5樓2019-05-23 10:54:30
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
材料325求調(diào)劑
 30+6
|
mariusuki 2026-03-02 | 11/550 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 267化工調(diào)劑求助 +7 | 聰少OZ 2026-03-04 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工284求調(diào)劑 +4 | 小黑想變白 2026-03-07 | 4/200 |
|
|
[考博] 售瀆SCI文章，我:8⊙ 55 1⊙ 54。備注【⊙=0】 +4 | vs9ky3szrj 2026-03-06 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0307化學(xué)求調(diào)劑 +5 | 0ok0k 2026-03-07 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 346分材料求調(diào)劑 +3 | snow_反季節(jié)版 2026-03-07 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 售瀆SCI文章，我:8⊙ 55 1⊙ 54。備注【⊙=0】 +3 | ipys00zm58 2026-03-06 | 4/200 |
|
|
|
[考博] 售瀆SCI文章，我:8⊙ 55 1⊙ 54。備注【⊙=0】 +4 | ipys00zm58 2026-03-05 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 初試297求調(diào)劑 +3 | 一個蘿蘿 2026-02-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 290分材料工程085601求調(diào)劑 數(shù)二英一 +9 | llx0610 2026-03-02 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085600，一志愿鄭州大學(xué)，280分求調(diào)劑 +7 | Wuqi725 2026-03-05 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085601專碩347分求調(diào)劑 +4 | 啊歐歐歐 2026-03-04 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化學(xué) 0703求調(diào)劑 總分293 一志愿211 +9 | 土土小蟲 2026-03-03 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 085600 材料與化工 298 +14 | 小西笑嘻嘻 2026-03-03 | 14/700 |
|
|
|
[考研]
 一志愿中南大學(xué)理學(xué)化學(xué)
+6
|
15779376950 2026-03-01 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0854總分272 +5 | 打小就是老實(shí)人 2026-03-02 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化工京區(qū)271求調(diào)劑 +7 | 11ing 2026-03-02 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿東北大學(xué)材料專碩328，求調(diào)劑 +3 | shs1083 2026-03-02 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 亭亭亭01 2026-03-01 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 317一志愿華南理工電氣工程求調(diào)劑 +6 | Soliloquy_Q 2026-02-28 | 11/550 |
|