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Jarnnney新蟲 (小有名氣)
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[求助]
BSA封閉磁珠立馬出現(xiàn)聚沉
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我的磁珠和cdna在PBST中(PH7.4)37度偶聯(lián)4.5h,之后加入含1%BSA的PBST(PH7.4)封閉時 立馬聚沉,而且顏色由土黃色變成了鐵銹紅,這是為什么呢? @liubin 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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我試過PH6.0的條件偶聯(lián)后加入含BSA的PBST,依然是立刻出現(xiàn)沉淀。 哪怕是剛?cè)〕龅拇胖槟敢杭尤敕忾]液也是立馬沉淀。這是為什么呢? 而且我不論是在PH7.4還是6.0的體系,都偶聯(lián)不上適配體 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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偶聯(lián)結(jié)束清洗了。 現(xiàn)在不是明顯的聚沉,就是從之前的那種融化的巧克力的絲滑感變成稍微沙沙的感覺,顏色也氧化變深棕紅。目前最大的問題是,磁珠偶聯(lián)不上適配體,而且偶聯(lián)液上清的吸光值不降反增,這是為什么呢? 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
新蟲 (小有名氣)
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-?EDC可能失活,建議嘗試新鮮配制的?EDC。 -?Sulfo-NHS中間體可能已經(jīng)水解,EDC和SulfoNHS?需即配即用。 -?蛋白量不足,建議提高包被濃度 -?羧基活化后直接加入蛋白。 -?避免引入帶有氨基基團的蛋白及復(fù)合物引起競爭反應(yīng) -?調(diào)整包被緩沖液或?PH。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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