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hlp0809新蟲 (小有名氣)
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[交流]
Crisp-cas9敲除 已有3人參與
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有沒有做過(guò)基因敲除的大佬，gibosn構(gòu)建好的左右500bp同源臂和N20質(zhì)粒，為什么后面誘導(dǎo)編輯失敗呢？敲除不成功需要注意那些事項(xiàng)呢？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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lzk234
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2樓2023-07-05 17:07:29
楊ry
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大佬 我想問(wèn)問(wèn)我做cas9的時(shí)候，第一次預(yù)實(shí)驗(yàn)誘導(dǎo)cas9和重組酶表達(dá)，轉(zhuǎn)化sgRNA質(zhì)粒后，重組子都是正確的，后面再重復(fù)的時(shí)候，全是假陽(yáng)性，有的長(zhǎng)的很多，有的長(zhǎng)的少； 不誘導(dǎo)cas9轉(zhuǎn)化sgRNA質(zhì)粒，預(yù)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候克隆長(zhǎng)得很多一個(gè)板幾百個(gè)符合預(yù)期，但后面重復(fù)的時(shí)候就長(zhǎng)得很少四五個(gè)這樣子，但也都是假陽(yáng)性，sgRNA的質(zhì)粒就是第一次提出來(lái)的那些，是一樣的，這是什么情況呢 |
3樓2023-07-07 11:18:52
lzk234
銅蟲 (小有名氣)
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4樓2023-07-11 15:50:54
hlp0809
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5樓2023-07-21 12:40:33
6樓2023-08-16 11:20:59
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