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qiafffff新蟲 (初入文壇)
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[求助]
轉(zhuǎn)基因煙草觀察不到GFP熒光,請問如何證明目的基因轉(zhuǎn)化成功?
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| 本人將目的基因連在帶有GFP標簽的PBI121載體上,轉(zhuǎn)化煙草,然后轉(zhuǎn)基因煙草在DNA和RNA水平都鑒定過有條帶,但是在熒光顯微鏡下觀察不到GFP的熒光,請問各位蟲友們,是什么原因啊?(之前做過瞬時的亞細胞定位,能觀察到熒光,證明載體應該沒問題,)我真的不知道該怎么判斷我的煙草是不是轉(zhuǎn)成功了,真誠希望得到大家的回答,幫幫孩子吧 |
至尊木蟲 (著名寫手)
新蟲 (初入文壇)
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qRTPCR做過,轉(zhuǎn)基因煙草的表達量是上調(diào)的,還沒做過western,請問您是說拿GFP做western嘛,可是如果看不見熒光的話,是不是很大概率在總蛋白水平western也雜不到呀? 發(fā)自小木蟲IOS客戶端 |
至尊木蟲 (著名寫手)
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PCR你再可以試試一個引物在目的基因上,一個在GFP上。用GFP的抗體做western可以試試,說不準是別的原因?qū)е驴床坏綗晒狻?br />
發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
新蟲 (初入文壇)
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