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天兆9611鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
有關(guān)IPTG誘導(dǎo)的相關(guān)問題 已有1人參與
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有關(guān)于誘導(dǎo)的問題一直有問題不明白想請教各位。 1.誘導(dǎo)前先將菌液培養(yǎng)至OD大約0.5左右后能否先放入4°里存放，待到需要誘導(dǎo)時(shí)取出加入IPTG再做誘導(dǎo)可以嗎？ 2.誘導(dǎo)完成后可以先將菌體離心后收集菌體，放入4°中暫存，過段時(shí)間后再加入緩沖液再破碎可以嗎？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
天兆9611: 金幣+10, ★★★很有幫助 2022-04-24 19:53:07
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
天兆9611: 金幣+10, ★★★很有幫助 2022-04-24 19:53:07
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為什么不趁著新鮮的時(shí)候誘導(dǎo)和離心破碎呢？ 關(guān)于第一個(gè)問題：菌誘導(dǎo)后到達(dá)0.5，正處于對數(shù)期是比較有活力的，放在4°C后因?yàn)榈蜏貢?huì)導(dǎo)致菌活下降，那么可能就會(huì)影響誘導(dǎo)結(jié)果。 第二個(gè)問題：誘導(dǎo)之后離心加緩沖液破碎放在4°C會(huì)比較好，如果直接離心菌體，菌自身蛋白酶可能會(huì)你的目的蛋白降解。 |
2樓2022-04-24 11:07:59
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3樓2022-04-24 11:18:36
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4樓2022-04-24 11:50:57
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5樓2022-04-25 09:59:53
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