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構(gòu)建質(zhì)粒，目的基因前加信號肽導致目的基因缺失或大腸桿菌致死 已有1人參與
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發(fā)現(xiàn)了有趣的現(xiàn)象 在構(gòu)建質(zhì)粒過程中，在目的基因前加信號肽導致會目的基因序列缺失或大腸桿菌致死，大家有沒有遇到這樣的情況？或者大概分析一下可能是哪些原因呢？  |
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pennchem
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2樓2021-06-10 10:35:29
3樓2021-06-15 10:20:54
pennchem
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【答案】應助回帖
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ccdB蛋白的毒性作用是通過與促旋酶GyrA亞基第462位氨基酸相結(jié)合使得DNA斷裂后不能進行修復，DNA合成受阻，導致細胞死亡。 DB3.1菌株的細胞含有gyrA462基因，能夠表達GyrA亞基蛋白與ccdB結(jié)合的區(qū)域，可以競爭性抑制ccdB蛋白的活性，使得促旋酶可以正常行使功能，實現(xiàn)含有ccdB的載體的正常擴增。 -------------------------以上轉(zhuǎn)自豆丁 根據(jù)以上信息, 是不是可以理解為信號肽可能是ccdB蛋白在空間上逃逸GyrA的結(jié)合, 從而致死(這只是推測, 可能性之一吧) |
4樓2021-06-15 21:53:22
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